Practica 3
TINCIÓN SIMPLE
en la práctica... visualizamos al microscopio bacterias fermentadoras del yogur y Saccharomyces boulardii, en extensiones fijadas por calor y teñidas con azul de metileno.
¿ Qué bacterias son fermentadoras del yogur ?
El yogur es el producto de fermentación de la leche, llevada a cabo por las bacterias Streptococcus thermophilus y Lactobacillus acidophilus - bulgaricus.
- Los Streptococcus thermophilus se ven como cadenas de bacterias esféricas.
- Los Lactobacillus se ven como cadenas de bacterias alargadas.
¿ Qué es el azul de metileno y por qué es una tinción simple ?
El azul de metileno es una tinción simple, porque sólo contiene un colorante, que es el azul de metileno. Un colorante que al ser básico se une a estructuras ácidas, como los ácidos nucleicos, y que en esta tinción colorea todas las bacterias y levaduras de azul.
¿ Qué objetivo tengo que usar ?
Para visualizar microorganismos fijados y teñidos se empieza por el objetivo 4x y se va aumentando 10x 40x, hasta llegar al objetivo 100x con aceite de inmersión.
¿ Qué necesito ?
- Yogur natural, con Streptococcus thermophilus y Lactobacillus spp.
- Ultra Levura, con levadura Saccharomyces boulardii.
- Azul de metileno 1%.
- Portaobjetos.
- Puente de tinciones.
- Microscopio óptico.
Resultados.
Hemos podido observar los S.thermophilus y las S.boulardii.
En relación con los Lactobacillus.spp a sido más complicado poder visualizarlos con claridad, pero parecer ser que hemos podido verlos tras buscarlos detenidamente.
Cadenas de S.thermophilus y Lactobacillus.spp
Agrupaciones de S.boulardii.
Observaciones.
Nuestro equipo de trabajo hemos llegado a la conclusión, tras la visualización en el microscopio que los streptococcus y las levaduras son bastante similares pero se puede diferenciar por sus dimensiones, ya que los streptococcus son mucho más grandes que las levaduras 💭
Hay una muestra que no pudimos visualizar nada por su alta concentración. Tras haber hecho la tinción se pudo ver que por esta razón se formó de forma visual una aglutinación, impidiendo distinguir cualquier microorganismo :(
Pero... realizamos por último la observación con el objetivo de 100x. Utilizamos el aceite de inversión y pudimos ver la muestra con más detalle 🎉🥳
Aquí adjunto unas imágenes del proceso de tinción.
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