CULTIVO DE CONTAMINACIÓN AMBIENTAL.

 práctica 4

MEDIO DE CULTIVO - CONTAMINACIÓN AMBIENTAL

en la práctica... preparamos un medio de cultivo sólido, lo sembramos y hacemos un cultivo con los microorganismos presentes en ventanas-bancadas del laboratorio.

¿ Qué es un medio de cultivo sólido ?

Un medio de cultivo es una solución cuya composición permite el desarrollo y crecimiento de los microorganismos.

Los hay de muchos tipos y algunos contienen ingredientes adicionales, para aumentar su capacidad funcional.

Sin embargo, todos los medios de cultivo sólido tienen un aspecto en común, están hechos con una concentración 12 - 15 g/L de Agar, que es el agente solidificante.

¿ Cómo conservo mi medio de cultivo ?

Una vez solidificado el medio de cultivo, se conserva sellado y dentro de una bolsa, pudiendo mantenerse viable 4-6 meses a 2-8 ºC de temperatura.

¿ Qué medios de cultivo necesito para estudiar la contaminación ambiental ?

El estudio de la contaminación ambiental, se van a utilizar dos medios de cultivo:

- TSA.

- Malta.

Adicionalmente, se puede tomar una muestra con hisopo de alguna otra superficie, donde pensemos que hay bacterias y hacer un cultivo en agar nutritivo.

¿ Cómo hemos tomado muestras de microorganismos de la ventana y la bancada ?

Como lo que queremos estudiar es la contaminación ambiental, para sembrar los medios de cultivo es suficiente con dejar las placas Petri abiertas sobre la ventana y sobre la bancada.

placas sembradas

placas abiertas

Observaciones.

Consejo 1:

Es muy importante que el medio de cultivo no se contamine, ya que podría dar pie a crecimiento de bacterias que no interesan. Para evitar que suceda:

- hay que esterilizarlo una vez ha sido distribuido en la placa Petri.

- hay que trabajar dentro de un perímetro de 10-15 cm alrededor de la llama del mechero Bunsen, es un perímetro libre de partículas.

- la boca del matraz Erlenmeyer donde se prepara el medio hay que flamearla antes de verter el medio para distribuirlo.

Consejo 2:

Cuidado con no poner demasiado papel de plata para autoclavar el matraz Erlenmeyer con medio de cultivo, pues nosotros pusimos demasiado y tuvimos que cambiarlo.

tiene que quedar así :)

Ejercicios:

9. Anotar las diferencias que se observen entre el medio TSA y el Agar Malta y entre las dos localizaciones y responder a las siguientes preguntas:

- ¿Crecen colonias del mismo tipo en ambos medios? ¿Cuál es la principal diferencia ?

No, en el Agar Malta crecen mayoritariamente hongos ya que el extracto de malta contiene todos los nutrientes necesarios para favorecer el crecimiento de hongos. El bajo pH del medio produce una inhibición parcial o completa de las bacterias contaminantes, pero es bien tolerado por los hongos ( selectivo ). En el Agar TSA hay más variedad de bacterias y pocos hongos ya que es un medio nutritivo general para una amplia variedad de usos. Debido a su excelente valor nutritivo, puede ser utilizado para el crecimiento y aislamiento de bacterias aeróbicas y anaeróbicas y para favorecer el desarrollo de la mayoría de microorganismos exigentes.

- ¿Hay alguna característica común a las colonias crecidas?  ¿ Predomina algún tipo particular?

Si, se puede observar que hay más crecimiento en las placas de la ventana. Además, en las de TSA ventana han crecido más hongos que en TSA bancada.

Si, tanto en el agar malta como TSA, hay presencia de hongos. Hay más hongos en el agar malta ya que este es selectivo. En el TSA, además de hongos, se observan bacterias de distinto aspecto, morfología y color.

10. Anotar las diferencias que observes entre las placas con Agar Nutritivo y responder a las siguientes preguntas:

- ¿Qué se observa en las placas de Agar Nutritivo? ¿Qué son las manchas que se ven? ¿Hay tipos diferentes  de manchas?

Podemos observar colonias variadas, la mayoría presentan coloración amarilla y el resto son rojas, naranjas y negras. Mayoritariamente presentan textura mucosa y son circulares. En algunas placas, se observan hongos pero hay muy pocos.

- ¿Hay alguna diferencia en el crecimiento bacteriano entre las huellas de las placas rotuladas antes y después y entre el lavado de manos con jabón y con gel hidroalcohólico? ¿ Qué significa esa diferencia?

El crecimiento dependerá de la superficie elegida por cada persona. Con esto se puede comprobar que hay más crecimiento en zonas como barandillas, fregaderos o mostradores ya que son zonas comunes por las que pasa gente a diario.

  

También influye la higiene de cada persona, comprobando así la importancia de una buena higiene tanto de manos como de las superficies comunes para trabajar en condiciones seguras y evitar así posibles contaminaciones.